| 抗淋巴样增强因子-1羧基端单克隆抗体的制备及其表位的初步鉴定 |
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| 引用本文： | 杨明珍,李鹏,张竹君,易维京,李淑慧,赵利军,胡川闽.抗淋巴样增强因子-1羧基端单克隆抗体的制备及其表位的初步鉴定[J].免疫学杂志,2008,24(2):142-145. |
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| 作者姓名： | 杨明珍 李鹏 张竹君 易维京 李淑慧 赵利军 胡川闽 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室,重庆,400038
2. 美国北卡罗来纳大学化学与生物化学系 |
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| 摘 要： | 目的 制备抗淋巴样增强因子-1(LEV-1)羧基端86个氨基酸(Lct86)特异性单克隆抗体,并初步明确其表位,为进一步研究LEF-1 C端特异序列的功能奠定基础.方法 从Jurkat细胞株中扩增LEF-1 C端特异序列eDNA,并克隆入PQE40、pET32a原核表达载体;分别转化入M15、BL21(DE3)感受态菌,IPIG诱导表达;纯化PQFAO-Lct86融合蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体,以pET32a-Lct86融合蛋白鉴定单克隆抗体特异性.LEF-1 C端特异序列不同长度的基因片段定向克隆人PQE40,鉴定各片段的表达,利用Western blotting初步鉴定单克隆抗体的表位.结果 成功构建了PQE40-Lct86、pET32a-Lct86重组原核表达载体;纯化获得PQE40-Lct86融合蛋白;得到一株特异性的抗LEF-1 C端单克隆抗体TMAb1,证实其表位位于437aa～454aa.结论 成功制备了一株特异性的抗LEF-1 C端单克隆抗体TMAb1,并鉴定其抗原识别表位位于437aa～454aa,为进一步研究LEF-1 C端的功能奠定基础.
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| 关 键 词： | LEF-1 单克隆抗体 表位 |
| 文章编号： | 1000-8861（2008）02-0142-04 |
| 收稿时间： | 2007-10-26 |
| 修稿时间： | 2007-12-05 |
Preparation and antigenic epitope identification of the monoclonal antibody against lymphoid enhancer factor-1 carboxyl terminus |
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| YANG Ming-zhen,LI Peng,ZHANG Zhu-jun,YI Wei-jing,LI Shu-hui,ZHAO Li-jun,HU Chuan-min.Preparation and antigenic epitope identification of the monoclonal antibody against lymphoid enhancer factor-1 carboxyl terminus[J].Immunological Journal,2008,24(2):142-145. |
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| Authors: | YANG Ming-zhen LI Peng ZHANG Zhu-jun YI Wei-jing LI Shu-hui ZHAO Li-jun HU Chuan-min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | LEF-1 Monoclonal antibody Antigenic epitope |
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