miR-27b-3p对主动脉血管平滑肌细胞和单核细胞功能的影响及机制研究

背景与目的 大数据基因芯片数据分析发现，在腹主动脉瘤（AAA）组织与患者血清中miR-27b-3p表达显著上调。然而，miR-27b-3p在主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）中的功能及作用机制尚不清楚。因此，本研究探讨miR-27b-3p在VSMC中的功能，及其对单核巨噬细胞、细胞外基质的影响和作用机制。方法 将VSMC转染miR-27b-3p抑制物后，用CCK-8检测细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡。将单核巨噬细胞THP-1转染miR-27b-3p抑制物后，用ELISA法检测炎症因子表达，Western blot检测基质相关蛋白表达水平。用双萤光素酶报告基因实验以及相关功能实验验证miR-27b-3p和PTEN的靶向关系。结果 miR-27b-3p敲低后，VSMC增殖能力明显增强，细胞凋亡率明显降低（均P<0.05）。miR-27b-3p敲低后，THP-1中促炎症因子（TNF-α、IL-12）表达水平、基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平明显降低，而抑炎因子（IL-4、IL-10）表达水平、金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达水平明显升高（均P<0.05）。双萤光素酶实验证实miR-27b-3p的靶基因为PTEN。miR-27b-3p过表达的VSMC中PTEN蛋白表达水平明显下调（P<0.05），而PTEN过表达的VSMC增殖活力明显增强、凋亡比例明显减少（P<0.05）。PTEN过表达THP-1的TNF-α、IL-12表达水平与MMP-9蛋白表达水平下调，同时IL-4、IL-10浓度与TIMP-1蛋白表达水平上调（均P<0.05）。miR-27b-3p和PTEN同时过表达后，VSMC与THP-1以上指标的变化与对照组差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 miR-27b-3p可通过靶向PTEN参与调节VSMC增殖和凋亡，抑制单核巨噬细胞的炎症反应和细胞外基质蛋白表达。miR-27b-3p/TPEN分子轴可能在AAA发生和进展过程发挥重要作用。

Effect of miR-27b-3p on the function of aortic vascular smooth muscle cells and monocytes and the mechanism