| 双重实时荧光PCR快速检测O157大肠杆菌的初步研究 |
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| 引用本文： | 张建华,卢亦愚,程苏云,陆群英,叶菊莲,罗芸.双重实时荧光PCR快速检测O157大肠杆菌的初步研究[J].现代预防医学,2007,34(14):2611-2613. |
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| 作者姓名： | 张建华 卢亦愚 程苏云 陆群英 叶菊莲 罗芸 |
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| 作者单位： | 1. 兴文理学院医学院,绍兴,312000
2. 浙江省疾病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 浙江省卫生厅医药卫生科学研究基金 |
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| 摘 要： | 目的]建立双重实时PCR体系,实现对O157大肠杆菌rfbE和stx2基因的同步检测。方法]根据GenBank公布的O157大肠杆菌rfbE和stx2基因序列,应用分子生物学软件设计两对引物和TaqMan探针,并对荧光定量PCR反应条件进行优化,建立实时荧光定量PCR检测O157大肠杆菌的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行了评价。结果]所有O157大肠杆菌菌株的检测结果均为阳性,而所有其他菌株检测结果均为阴性;该方法对O157大肠杆菌纯培养的检测范围为10^0～10^6cfu/μl,重复性检测的变异系数均小于5%。对模拟污染牛奶样本的检测范围为10^2～10^6cfu/μl。从细菌核酸提取至完成检测约需3h。结论]基于Taqman探针技术的实时PCR检测体系可同步检测O157大肠杆菌rfbE和stx2基因,具有快速、灵敏度高、特异性强等优点,可用于O157大肠杆菌食物中毒的快速诊断和食品微生物检测。
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| 关 键 词： | 实时PCR Taqman探针 O157大肠杆菌 检测 |
| 文章编号： | 1003-8507（2007）14-2611-03 |
| 收稿时间： | 2007-06-02 |
| 修稿时间： | 2007-06-02 |
PRELIMINARY RESEARCH ON RAPID DETECTION OF ESCHERICHIA COLI O157 WITH DUPLEX REAL-TIME FLUORESCENCE PCR ASSAY |
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| ZHANG Jian-hua, LU Yi-yu, CHENG Su- yun,et al..PRELIMINARY RESEARCH ON RAPID DETECTION OF ESCHERICHIA COLI O157 WITH DUPLEX REAL-TIME FLUORESCENCE PCR ASSAY[J].Modern Preventive Medicine,2007,34(14):2611-2613. |
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| Authors: | ZHANG Jian-hua LU Yi-yu CHENG Su- yun |
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| Institution: | Medical School of Shaoxing University, Shaoxing 312000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Real-time fluorescence PCR Taqman--based probe Enterohemorrhagic E coli O157 Detection |
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