MAT2A siRNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长的影响

目的探讨MAT2A小干扰RNA对荷瘤鼠肝癌细胞生长和细胞凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将MAT2A小干扰RNA质粒表达载体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞，建立持续转录小干扰RNA的细胞系，并将该细胞系皮下接种裸鼠，观察肿瘤生长情况；为进一步观察裸鼠体内抑瘤性，将皮下接种稳定表达小干扰RNA的Bel-7402细胞系的裸鼠分为三组：A、盐水对照组，B、空质粒对照组，C、siRNA治疗组；于接种后第12天，每组动物行纯化质粒DNA瘤内注射，观察肿瘤大小；治疗后2周，处死所有动物，取肿瘤，测量大小；部分石蜡包埋切片、HE染色，部分进行凋亡检测。结果得到稳定转染siRNA载体、并能持续表达siRNA的Bel-7402细胞系，将稳定建系的细胞传代，持续表达siRNA细胞系肿瘤细胞生长明显缓慢。皮下接种建系的Bel-7402细胞建立荷瘤鼠模型，可以观察到siRNA组肿瘤生长缓慢，平均第13天才长出皮下可及、但肉眼看不到的肿瘤，而接种control siRNA组，平均第9天可长出肉眼可见的肿瘤；用裸鼠肿瘤模型观察siRNA的体内抑瘤效果，质粒DNA注射后，对照组瘤体10．93mm^3，空质粒对照组为11．13mm^3，而siRNA质粒转染组为4．26mm^3（P〈0.01）；HE染色显示，对照组和空质粒组质粒DNA注射后，病灶充满肿瘤细胞；而siRNA组质粒DNA注射后，病灶内有大量炎性细胞浸润，坏死明显，仅见少量肿瘤细胞；且siRNA明显诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡，其凋亡指数为（28．79±2．13）％，较盐水对照组（9．54±1．89）％和空质粒治疗组（10．24±2．06）％明显升高（t=15．41，P〈0．01）。结论靶向MAT2A基因的siRNA诱导荷瘤鼠肝癌细胞凋亡，抑制肝癌细胞生长。

Effects of MAT2A siRNA on growth of implanted human hepatoma cells in nude mice