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人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建及鉴定
引用本文:陈星,糜若然,伊铁忠,瞿全新,熊冬生,邵晓枫,姜文国,许元富,杨纯正,郑曙民. 人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建及鉴定[J]. 中国肿瘤临床, 2006, 33(11): 625-628
作者姓名:陈星  糜若然  伊铁忠  瞿全新  熊冬生  邵晓枫  姜文国  许元富  杨纯正  郑曙民
作者单位:1. 天津医科大学总医院妇产科,天津市,300052
2. 中国医学科学院协和医科大学血液学研究所药物室国家重点实验室
3. 山西省肿瘤医院妇科
摘    要:目的:克隆血管内皮生长因子C(Vascular Endothelial Growth Factor C)功能片段的cDNA,构建人VEGF-C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF—C在宫颈癌中表达的意义及在淋巴管生长及转移中的作用。方法:根据人VEGF—CcDNA序列,设计合成二对特异性引物,第一对5’端含有EcoR Ⅰ及第二对3’端含有XhoI酶切位点。运用RT—PCR法克隆人MDA—MB231中的VEGF—C cDNA部分编码序列(CDS):经双酶切后将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组质粒在处于感受态的大肠杆菌DH5d中扩增,纯化。通过PCR和双酶切鉴定阳性重组子及进行基因序列的测定。结果:用RT—PCR克隆到VEGF—CcDNA部分CDS;PCR和双酶切鉴定阳性重组子,显示有人VEGF—C cDNA编码序列,基因序列测定显示重组质粒上插入的人VEGF—C序列正确。结论:从富含VEGF—C的人MDA—MB231细胞系中克隆得到的VEGF—C基因功能片段cDNA.成功构建了人真核表达栽体pcDNA3.1(+)/VEGF-C。

关 键 词:血管内皮生长因子  克隆  真核表达载体
文章编号:1000-8179(2006)11-0625-04
收稿时间:2005-09-16
修稿时间:2005-09-162006-04-11

Construction of the Eukaryotic Expression Vector for Human VEGF-C
Chen Xing, Mi Ruo-ran, Yi Tiezhong, et al. Construction of the Eukaryotic Expression Vector for Human VEGF-C[J]. Chinese Journal of Clinical Oncology, 2006, 33(11): 625-628
Authors:Chen Xing   Mi Ruo-ran   Yi Tiezhong   et al
Affiliation:Department of Obstetrics and Gynecology, Tianjin Medical University General Hospital, Tianjin
Abstract:
Keywords:Vascular endothelial growth factor-c Clone Eukaryotic expression vector
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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