右美托咪定减轻皮质酮抑制神经干细胞的增殖作用及机制

目的：探讨右美托咪定（DEX）减轻皮质酮（CORT）抑制神经干细胞（NSCs）的增殖作用及其可能的作用机制。方法：取孕15 d SD大鼠，分离胎鼠大脑皮质培养原代NSCs，进行NSCs标志蛋白神经上皮干细胞蛋白（Nestin）和胚胎干细胞关键蛋白（SOX2）染色鉴定；RT-PCR法检测肾上腺α-2受体各亚型α-2A受体、α-2B受体及α-2C受体在NSCs上的表达；将NSCs分为Control组、DMSO组、CORT组（CORT 1 μmol/L孵育24 h）和DEX组（DEX 0.01、0.1、1 μmol/L预处理1 h后，再加入CORT继续孵育24 h）。LDH法检测NSCs的细胞毒性；EdU法检测细胞增殖能力；Western blot检测NSCs GSK-3β/β-catenin通路GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin和Cyclin D1表达水平。结果：分离的原代细胞经Nestin蛋白和SOX2蛋白染色鉴定NSCs的纯度超过97%；RT-PCR结果显示肾上腺α-2受体的3种亚型在NSCs上均有表达；LDH法显示各组之间LDH的释放量差异无统计学意义。EdU法显示与Control组比，CORT组的NSCs增殖能力显著被抑制（P＜0.05）；与CORT组相比，当DEX剂量增加至1 μmol/L时，NSCs的增殖能力有所恢复（P＜0.05）。Western blot结果表明与Control组、DMSO组比，CORT组p-GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1蛋白的相对表达量显著下降（P＜0.05），与CORT组比，1 μmol/L DEX预处理后，p-GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1蛋白的相对表达量有所提升（P＜0.05），Total GSK-3β蛋白在各组间的相对表达量没有明显变化；PI3K磷酸化抑制剂LY294002拮抗DEX对NSCs增殖的保护作用（P＜0.05）。结论：DEX可以减轻CORT抑制NSCs的增殖作用，其机制与GSK-3β/β-catenin信号通路有关。

Dexmedetomidine alleviates proliferation of neural stem cells from corticosterone-induced injury and its mechanisms