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人巨细胞病毒增殖性感染UL111A基因转录本特征及变化
引用本文:刘欣,谢旺凯,孙祥威,陈治元,沈贤,薛向阳. 人巨细胞病毒增殖性感染UL111A基因转录本特征及变化[J]. 温州医科大学学报, 2020, 50(2): 87-91. DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2020.02.001
作者姓名:刘欣  谢旺凯  孙祥威  陈治元  沈贤  薛向阳
作者单位:1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 胃肠外科,浙江 温州 325027;2.温州医科大学 基础医学院 微生物学与免疫学教研室,浙江 温州 325035
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81672707,31670922)。
摘    要:目的:探究人巨细胞病毒(HCMV)UL111A基因在增殖性感染不同时间点的转录本特征及变化。方法:在HCMV AD169株感染人包皮成纤维细胞(HFF)12 h,24 h,48 h,3 d,5 d,7 d,9 d等不同时间点,抽提RNA,反转录成cDNA,PCR检测UL111A转录本特征。扩增产物通过克隆、测序验证不同时间点UL111A转录本的特征变化。利用真核表达载体pcDNA3.1构建UL111A 3种转录本编码区序列载体pcDNA3.1-cmvIL-10,pcDNA3.1-LAcmvIL-10以及pcDNA3.1-unspliced,Western blot验证构建的载体在293T细胞中的有效表达。结果:感染HCMV AD169株的HFF可以检测到cmvIL-10,LAcmvIL-10以及未剪切3种形式转录本。未剪切形式转录本占比最多,cmvIL-10转录本占比最少。在感染的24 h和9 d 3种转录本都有检测到,而在其他时间点未能检测到cmvIL-10 转录本。此外,3 种转录本的编码区序列在293T细胞中均可有效表达。结论:HCMVUL111A基因在增殖性感染不同时间点存在3种形式的转录本。

关 键 词:人巨细胞病毒  UL111A基因  转录本  

Characteristics of transcripts and changes of UL111A gene during the productive phase of infection in HCMV
Liu Xin,Xie Wangkai,Sun Xiangwei,Chen Zhiyuan,Shen Xian,Xue Xiangyang. Characteristics of transcripts and changes of UL111A gene during the productive phase of infection in HCMV[J]. JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL UNIVERSITY, 2020, 50(2): 87-91. DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2020.02.001
Authors:Liu Xin  Xie Wangkai  Sun Xiangwei  Chen Zhiyuan  Shen Xian  Xue Xiangyang
Affiliation:1.Department of General Surgery, the Second Affiliated Hospital & Yuying Children’s Hospital of Wenzhou Medical University, Wenzhou 325027, China; 2.Department of Microbiology and Immunology, School of Basic Medical Sciences, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, China
Abstract:
Keywords:
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