EBV-LMP1与HSP90 β真核双表达质粒的构建及体外表达

目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）与热休克蛋白90β（HSP90β）基因，构建其真核双表达质粒pIRES—LMP1-HSP90β，并检测其在体外的表达。方法提取鼻咽癌组织总RNA，逆转录PCR获得LMP1基因片段和HSP90β基因片段，将二者连接于真核双表达质粒pIRES中，测定序列后，用脂质体包裹转染COS细胞，采用RT—PCR和Western blot检测LMP1和HSP90β的表达。结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确，该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90β分子。结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90β分子。