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重组豹蛙酶的制备及其生物学特性分析
引用本文:汪 楠,唐小军,熊四平,郑 峰,张慧林,高 畅,李文杰,董 华,朱 进.重组豹蛙酶的制备及其生物学特性分析[J].南京医科大学学报,2013(8):1034-1038.
作者姓名:汪 楠  唐小军  熊四平  郑 峰  张慧林  高 畅  李文杰  董 华  朱 进
作者单位:南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,病理学系,江苏 南京 210029;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002;南京医科大学附属妇幼保健院妇产科,江苏 南京 210024;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,病理学系,江苏 南京 210029;南京医科大学附属妇幼保健院妇产科,江苏 南京 210024;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,病理学系,江苏 南京 210029;南京军区军事医学研究所,江苏 南京 210002
基金项目:南京市科技发展项目(ZKX12025)
摘    要:目的:通过构建豹蛙酶原核表达载体pColdⅡ-Rap,表达?纯化豹蛙酶并研究其生物学活性?方法:合成豹蛙酶全基因序列,克隆于原核表达载体pColdⅡ中,鉴定正确后转化至大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE和Western blot验证豹蛙酶的表达;大量表达重组豹蛙酶融合蛋白(Rap-His),通过MTT法分析Rap-His对乳腺癌细胞增殖的影响?结果:成功构建了pColdⅡ-Rap原核表达载体,经优化表达?纯化的条件,获得纯度较高的Rap-His;MTT法检测结果表明,该融合蛋白在320?160 μg/ml时对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制率在加药后4 d达到93.49%?结论:本研究制备的重组Rap-His融合蛋白能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖?这为进一步与肿瘤特异抗体偶联,构建肿瘤特异性靶向药物的研究奠定了基础?

关 键 词:豹蛙酶  融合蛋白  细胞增殖抑制
收稿时间:2013/2/17 0:00:00

Preparation and characterization of recombinant ranpirnase
Wang Nan,Tang Xiaojun,Xiong Siping,Zheng Feng,Zhang Huilin,Gao Chang,Li Wenjie,Dong Hua and Zhu Jin.Preparation and characterization of recombinant ranpirnase[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2013(8):1034-1038.
Authors:Wang Nan  Tang Xiaojun  Xiong Siping  Zheng Feng  Zhang Huilin  Gao Chang  Li Wenjie  Dong Hua and Zhu Jin
Institution:Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Huadong Medical Institute of Biotechniques,Nanjing 210002;Department of Obstetrics and Gynecology,the Affiliated Maternity and Child Health Hospital of NJMU,Nanjing 210024,China;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Department of Obstetrics and Gynecology,the Affiliated Maternity and Child Health Hospital of NJMU,Nanjing 210024,China;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,Department of Pathology,NJMU,Nanjing 210029;Huadong Medical Institute of Biotechniques,Nanjing 210002
Abstract:
Keywords:ranpirnase  fusion protein  inhibition of cell proliferation
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