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多聚乙烯亚胺介导肿瘤细胞基因转染
引用本文:鲁 悦,杨 航,袁 林,徐国平,姚志峰,刘永彪.多聚乙烯亚胺介导肿瘤细胞基因转染[J].南京医科大学学报,2012(12):1684-1689.
作者姓名:鲁 悦  杨 航  袁 林  徐国平  姚志峰  刘永彪
作者单位:1南京医科大学附属肿瘤医院放疗科,江苏 南京 210009;2南京医科大学第一附属医院放疗科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院放疗科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院放疗科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院放疗科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院放疗科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院放疗科,江苏 南京 210029
基金项目:国家自然科学基金资助(30870741)
摘    要:目的:利用阳离子多聚物多聚乙烯亚胺(PEI)纳米凝胶将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)转入同步化的肿瘤细胞中并检测绿色荧光蛋白的表达率,探讨PEI作为载体介导肿瘤细胞基因转染中细胞周期对转染效率的影响?方法:通过6 MV X线照射及药物阻滞使Hela及A549细胞同步化,在5个PEI/DNA梯度比(2/2?4/2?6/2?8/2?10/2 ?滋g/?滋g)下利用PEI介导EGFP报告基因转染进入上述同步化细胞,流式细胞仪和荧光显微镜下测定绿色荧光蛋白表达率,通过梯度试验分析细胞周期时相与表达率之间的关系?结果:在不同增殖状态及PEI/DNA比值梯度下,一定剂量-时间的X射线和顺铂可以使Hela细胞同步化于S期,一定剂量-时间的艾素可以使A549细胞同步化于G2/M期,而血清饥饿法培养则可以使细胞阻滞于G0/G1期,在不同细胞周期时相下EGFP的转染效率不同,两种同步化细胞均表现出S期及G2/M期细胞的转染率显著高于对照组(P < 0.05)和G0/G1期细胞(P < 0.0001)?结论:PEI导入基因的表达效率受细胞周期制约,PEI介导的基因转染受到宿主细胞摄取?转运入核及转录能力的影响,而该进程都是细胞周期依赖性的?

关 键 词:多聚乙烯亚胺  转染  细胞周期  Hela细胞  A549细胞
收稿时间:7/3/2012 12:00:00 AM

The polyethylenimine-mediated gene transfection in tumor cells
LU Yue,YANG Hang,YUAN Lin,XU Guo-ping,YAO Zhi-feng and LIU Yong-biao.The polyethylenimine-mediated gene transfection in tumor cells[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2012(12):1684-1689.
Authors:LU Yue  YANG Hang  YUAN Lin  XU Guo-ping  YAO Zhi-feng and LIU Yong-biao
Institution:1Department of Radiotherapy,the Affiliated Cancer Hospital of NJMU,Nanjing 210009;2Department of Radiotherapy,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China;Department of Radiotherapy,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China;Department of Radiotherapy,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China;Department of Radiotherapy,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China;Department of Radiotherapy,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China;Department of Radiotherapy,the First Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210029,China
Abstract:
Keywords:polyethyleneimine  transfection  cell cycle  Hela cell  A549 cell
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