| 2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒基因组非结构4区全长序列的扩增、克隆及分析 |
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| 引用本文： | 陈勇,封波,丛旭,魏来.2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒基因组非结构4区全长序列的扩增、克隆及分析[J].徐州医学院学报,2002,22(2):95-99. |
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| 作者姓名： | 陈勇 封波 丛旭 魏来 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院传染病研究室,江苏,徐州,221002
2. 北京大学人民医院,北京大学肝病研究所,北京,100044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (39770 6 84) |
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| 摘 要： | 目的 获得2a／Ⅲ型丙型肝炎病毒（HCV）基因组全长非结构（NS）4区克隆并作序列分析。方法 用限制性长段长度多态性分析（RFLP）基因分型方法筛选出2a／Ⅲ型HCV一株。为了获得该毒株全长NS4区基因序列，依据代表株序列的NS3区之′末端及NS5区之5′末端相对保守区域合成引物，以RT－nseted-PCR方法扩增一段1.3kb的片段cDNA；将此片段插入pUC19质粒载体。结果 克隆了丙型肝炎基因组非结构NS4区全长基因，构建了pUC-NS4重组体，对重组体进行酶切鉴定，克隆的cDNA与预计的片段大小相符，并作序列测定。结论 获得全长NS4区基因克隆，经序列分析表明，与日本HC－J6有较高的同源性（92.1%）。
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| 关 键 词： | 限制性片段长度多态性分析 聚合酶链反应 克隆 测序 转录重组体 克隆 基因扩增 HCV 2a／Ⅲ型丙型肝炎病毒 |
| 文章编号： | 1000-2065(2002)02-0095-05 |
Amplifying, cloning and sequence analyzing the gene of full- length NS4 region of genotype 2a/Ⅲ hepatitis C virus by using long nested PCR |
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| CHEN Yong,FENG Bo,CONG Xu,et al.Amplifying, cloning and sequence analyzing the gene of full- length NS4 region of genotype 2a/Ⅲ hepatitis C virus by using long nested PCR[J].Acta Academiae Medicinae Xuzhou,2002,22(2):95-99. |
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| Authors: | CHEN Yong FENG Bo CONG Xu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis C virus restricted fragment length polymorphism polymerase chain reaction clone sequencing recombinant |
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