| 重组人骨形成蛋白-7成熟肽的表达、纯化及活性的研究 |
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| 引用本文： | 梁克明,朱婧,李云峰,陈南春,陈苏民. 重组人骨形成蛋白-7成熟肽的表达、纯化及活性的研究[J]. 医学争鸣, 2005, 26(7): 636-639 |
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| 作者姓名： | 梁克明 朱婧 李云峰 陈南春 陈苏民 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的:研究重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7m)羧基端140个氨基酸成熟肽的大肠杆菌表达、纯化及活性,为其实际应用打下基础.方法:将编码此成熟肽的cDNA亚克隆入含PL启动子的表达质粒pDH2中,构建表达质粒pDH2-B7m,转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达;通过包涵体洗涤、离子交换层析纯化目的蛋白;用Western blot验证透析复性后表达蛋白的抗原性,用含荧光素酶报告基因专门用于检测BMP活性的细胞株C2C12-K4检测其活性.结果:成功构建了PL启动子控制的原核表达载体pDH2-B7m;42℃诱导5 h后表达量达到最高水平,约占菌体总蛋白40.3%,表达产物以包涵体形式存在.包涵体经洗涤、离子交换层析纯化,目的蛋白纯度至少在96.0%以上.Western blot实验证实其抗原性,细胞株C2C12-K4反应的检测表明透析复性后的rhBMP-7m有较强的活性.结论:成功地在E.coli中表达了hBMP-7m重组蛋白并证明其有较强的生物活性.
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| 关 键 词： | 人骨形成蛋白 表达载体构建 蛋白质纯化 生物活性分析 |
| 文章编号： | 1000-2790(2005)07-0636-04 |
| 修稿时间： | 2005-01-01 |
Expression, purification and activity of recombinant human bone morphogenetic protein-7 mature peptide |
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| LIANG Ke-Ming,ZHU Jing,LI Yun-Feng,CHEN Nan-Chun,CHEN Su-Min. Expression, purification and activity of recombinant human bone morphogenetic protein-7 mature peptide[J]. Negative, 2005, 26(7): 636-639 |
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| Authors: | LIANG Ke-Ming ZHU Jing LI Yun-Feng CHEN Nan-Chun CHEN Su-Min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human bone morphogenetic protein construction of expression vector protein purification analysis of biological activity |
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