NF-κB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡和相关分子的表达

目的 探讨NF-kB沉默联合苦参碱(matrine,MT)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及相关分子的表达.方法 构建NF-kB/P65 siRNA真核表达载体转染人肝癌细胞HepG2,RT-PCR检测NF-kB/P65基因沉默效果,并筛选出NF-kB/P65基因沉默稳定转染细胞株.将实验分为对照组、苦参碱组(1.5 g/L)、稳转细胞组和联合组(稳转细胞十苦参碱),流式细胞仪检测细胞凋亡率；分别用RT-PCR法和蛋白质印迹法检测细胞NF-kB/P65、CD95(Fas)、Smac、Survivin的mRNA和蛋白水平表达.结果 苦参碱组NF-kB/P65、CD95、Smac和Survivin的表达上调,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05)；稳转细胞组CD95和Smac的表达上调,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),NF-kB/P65和Survivin的表达下调,与对照组、苦参碱组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；联合组CD95和Smac的表达上调,与对照组、苦参碱组、稳转细胞组比较差异有统计学意义(P＜0.05),NF-kB/P65和Survivin的表达下调,与苦参碱组比较差异有统计学意义(P＜0.05).各组细胞凋亡率分别为3.21％、6.25％、11.82％、21.06％,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 NF-kB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡可能与CD95和Smac的表达上调及NF-kB/P65和Survivin的表达下调有关.