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牡蛎中戊型肝炎病毒检测方法的比较题录
作者姓名:王秋媛  张瑞婷  尹文娇  曹经瑗  李晓梅  毕胜利
作者单位:1. 山东第一医科大学(山东省医学科学院)公共卫生与健康管理学院;2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室
基金项目:国家科技重大专项(2018ZX10201002-009-002);
摘    要:目的对牡蛎中戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)检测方法进行比较, 为牡蛎中HEV的检测提供技术参考。方法参考欧盟ISO/TS 15216-2∶2019, 用蛋白酶K消化法对人工污染HEV粪便悬液的牡蛎消化腺标本进行前处理后, 分别用四种核酸提取方法进行HEV RNA提取, 通过Real time RT-PCR检测, 比较HEV回收率;分别用蛋白酶K消化法、蛋白酶K消化+PEG沉淀法和蛋白酶K消化+PEG沉淀+氯仿抽提法对人工污染的牡蛎消化腺标本进行前处理, 用最优核酸提取方法进行HEV RNA提取, 通过Real time RT-PCR检测, 比较三种前处理方法的HEV回收率和抑制率。将最优HEV检测方法应用于市售牡蛎标本检测。结果四种核酸提取方法的HEV回收率分别为1.37%, 2.50%, 4.24%和7.56%, 差异有统计学意义(F=847.220, P<0.001);三种前处理方法的HEV回收率分别为6.02%, 13.65%和21.17%, 差异有统计学意义(F=16.800, P<0.001), 蛋白酶K消化+PEG沉淀+氯仿抽提法回...

关 键 词:牡蛎  戊型肝炎病毒  前处理方法  核酸提取  Real time RT-PCR
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