| 食管癌点突变型DNA聚合酶β与绿色荧光蛋白重组表达载体的构建 |
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| 作者姓名： | 赵军 黄幼田 路静 杨洪艳 赵国强 董子明 |
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| 作者单位： | 郑州大学基础医学院,河南郑州,450052;郑州大学基础医学院,河南郑州,450052;郑州大学基础医学院,河南郑州,450052;郑州大学基础医学院,河南郑州,450052;郑州大学基础医学院,河南郑州,450052;郑州大学基础医学院,河南郑州,450052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (No.3 9870 2 87)，教育部科学技术研究重点项目 (No.0 2 0 88) |
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| 摘 要： | 目的构建携带食管癌点突变型DNA聚合酶β基因的重组真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-polβ.方法运用PCR方法,从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出点突变型的DNA聚合酶β基因,作为目的片段,T-A克隆至pGEM-TEasy载体,再定向克隆至pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体,重组质粒pEGFP-C3-polβ用限制性内切酶酶切和通用鉴定引物PCR扩增鉴定,并进行DNA序列分析.结果 DNA序列分析证实了重组载体中的DNA聚合酶β序列与已知的点突变型DNA聚合酶β基因序列相符.结论成功构建了携带食管癌点突变型DNA聚合酶β基因的重组的荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-polβ,为DNA聚合酶β基因的体内外表达及蛋白定位提供了理想的标记.
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| 关 键 词： | DNA聚合酶β 增强型绿色荧光蛋白 点突变 PCR扩增鉴定 |
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