Rs10993994对前列腺癌细胞MSMB基因转录的影响

背景与目的：全基因组相关联研究发现了染色体10q11区域的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)位点rs10993994与前列腺癌的遗传易感性相关,本研究探讨rs10993994影响前列腺癌发病风险的可能机制，即研究rs10993994对前列腺癌细胞微精液蛋白β(microseminoprotein beta，MSMB)基因转录活性的影响。方法：化学合成MSMB基因的启动子序列，由于位于序列中间的SNP位点rs10993994有2种等位基因(T/C)可能，合成2条启动子MSMB promoter-T和MSMB promoter-C。将2条启动子通过酶切的方法导入荧光素酶报告基因载体(pGL3-basic vectors)中，筛选阳性克隆后，将携带启动子的质粒转染入前列腺癌细胞PC-3和LNCaP中，最后通过荧光检测仪检测重组质粒中启动子的转录活性。结果：成功合成2条启动子序列：MSMB promoter-T和MSMB promoter-C；分别将启动子序列与荧光素酶报告基因载体重组，形成重组质粒pGL3-MSMB promoter-T和pGL3-MSMB promoter-C。在前列腺癌细胞PC-3中，重组质粒MSMB promoter-C组的相对荧光度为2.27±0.39，显著高于重组质粒MSMB promoter-T组(0.57±0.13)，差异有统计学意义(P＜0.05)；在前列腺癌细胞LNCaP中，重组质粒MSMB promoter-C组的相对荧光度为1.70±0.32，显著高于重组质粒MSMB promoter-T组(0.37±0.09)，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：重组质粒pGL3-MSMBpromoter-C的转录活性强于重组质粒pGL3-MSMB promoter-T的转录活性；rs10993994可以影响到MSMB基因启动子的启动转录活性，rs10993994位点上等位基因胞嘧啶(C)较胸腺嘧啶(T)更能促使MSMB基因转录。