| 摘 要： | 目的探讨人玻璃体体外培养对人视网膜色素上皮细胞收缩性的影响。方法 低传代(3-5代)人视网膜色素上皮细胞分两组体外培养,一组用普通培养液(含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12)培养,一组用体积分数25%玻璃体培养,应用I型胶原凝胶收缩实验检测收缩力的变化,应用免疫荧光技术检测细胞骨架蛋白Factin、αSMA和vinculin的定位染色,应用免疫印迹技术检测αSMA和vinculin蛋白的表达。结果 与普通培养液培养相比,低传代的人视网膜色素上皮细胞玻璃体中培养48h,胶原凝胶面积为(22127±2072)像素,明显大于在普通培养液中的凝胶面积(16084±1154)像素,细胞收缩能力显著下降,两组比较差异有统计学意义(t=4.412,P=0.012)。在普通培养液中,Factin、vinculin主要分布于细胞周边,vinculin形成的粘连斑粗大;而在玻璃体中培养后,Factin重组,在细胞的一端形成扁平伪足结构,vinculin主要分布于细胞扁平伪足端和细胞中央,形成的粘连斑明显变小。玻璃体培养后αSMA蛋白表达显著下降,与普通培养液相比差异有统计学意义(t=2.845,P=0.047);vinculin蛋白表达无显著变化(t=0.198,P=0.852)。结论 玻璃体培养可导致视网膜色素上皮细胞收缩性下降,这一作用可能与αSMA蛋白表达下调及vinculin重新分布有关。
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