基于CXCL12/CXCR4生物轴探讨清心饮抑制CVB3感染后CMVECs发生EndMT的作用

[目的] 探讨趋化因子12(chemokine 12，CXCL12)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4，CXCR4)生物轴在清心饮含药血清抑制柯萨奇B3病毒(Coxsackie virus B3，CVB3)感染后心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells，CMVECs)发生内皮间充质转分化(endothelial-mesenchymal transition，EndMT)过程中的作用。[方法] 取生长状态良好的CMVECs设计为正常对照组、模型组、CXCR4拮抗剂组、清心饮组和清心饮+CXCR4拮抗剂组。除正常对照组用含10%胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)的杜尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco‘s modification of Eaglews medium，DMEM)培养外，其余各组CMVECs先用CVB3培养基感染2 h，后弃去CVB3培养基，改为普通培养。通过细胞计数试剂(cell counting kit-8，CCK8)检测各组细胞活力，免疫荧光(immunofluorescence，IF)、免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction，Real-time qPCR)等实验方法检测内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM-1/CD31)、间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)、CXCL12和CXCR4的蛋白及基因表达。[结果] 与正常对照组比较，模型组CD31表达下降(P＜0.01)，α-SMA、CXCL12和CXCR4表达增强(P＜0.01)。与模型组比较，CXCR4拮抗剂组、清心饮组CD31表达增强(P＜0.01)，α-SMA和CXCR4表达下降(P＜0.01)，CXCR4拮抗剂组CXCL12表达差异无统计学意义(P＞0.05)，清心饮组CXCL12表达下降(P＜0.05)。与清心饮组比较，清心饮+CXCR4拮抗剂组CD31的表达增强(P＜0.05)，α-SMA、CXCL12和CXCR4表达下降(P＜0.01，P＜0.05)。[结论] CXCL12/CXCR4生物轴参与了CVB3感染后CMVECs发生EndMT的过程，拮抗CXCL12/CXCR4生物轴能够明显增强清心饮对该过程的抑制。

Observation on the Action of Qingxinyin Inhibiting EndMT in CVB3-infected CMVECs Based on CXCL12/CXCR4 Biological Axis