| 幽门螺杆菌oipA基因片段的克隆表达及抗原性分析 |
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| 引用本文： | 佘菲菲,李妮,林旭,陈豪. 幽门螺杆菌oipA基因片段的克隆表达及抗原性分析[J]. 中国免疫学杂志, 2009, 25(4) |
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| 作者姓名： | 佘菲菲 李妮 林旭 陈豪 |
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| 作者单位： | 福建医科大学病原生物学系,福建省感染与肿瘤重点实验室,福州,350004 |
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| 基金项目： | 福建省重大专项前期研究项目，福建省发改委资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:分片段克隆表达幽门螺杆菌oipA基因,确定抗原性最强的重组蛋白肽段.方法:从Hp国际标准株NCTC11637中获取oipA全长基因,克隆至pGEM-T载体并鉴定正确,以重组pGEM-T/oipA为模板PCR扩增6个不同大小的oipA基因片段,与表达载体pET-42a连接,转化大肠杆菌BL-21,重组子经PCR、酶切、测序鉴定.IPTG诱导重组蛋白肽段的表达,经Western Breeze 化学发光法鉴定融合蛋白;优化诱导时间和IPTG浓度,诱导重组蛋白大量表达;Ni-NTA His*Bind树脂亲和纯化表达产物;羊抗Hp多克隆抗体,Western blot法检测纯化蛋白的抗原性,间接ELISA法筛选抗原性最强的重组肽段.结果:6条oipA基因片段在大肠杆菌中都得到了表达,表达的蛋白肽段均可被抗Hp多克隆抗体识别,具有抗原性,其中反应性最强的是最小的蛋白肽段.结论:oipA基因片段可在原核系统中表达,所获取的最小的肽段抗原性最强,可望制备检测血清相应抗体的试剂盒.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 oipA基因片段 克隆 表达 抗原性 |
Cloning,expression and immunogenicity analysis of helicobacter pylori oipA gene fragments |
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| SHE Fei-Fei,LI Ni,LIN Xu,CHEN Hao. Cloning,expression and immunogenicity analysis of helicobacter pylori oipA gene fragments[J]. Chinese Journal of Immunology, 2009, 25(4) |
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| Authors: | SHE Fei-Fei LI Ni LIN Xu CHEN Hao |
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