宫颈癌细胞系中hTERT启动子水平及其与端粒酶活性相关性的研究

目的:探讨宫颈癌细胞系中人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子的活性及其与hTERT mRNA表达和端粒酶活性之间的关系。方法:应用脂质体转染法将hTERT核心启动子基因转入宫颈癌细胞系Hela和正常人皮肤表皮细胞中,并用荧光素酶检测实验检测其中hTERT启动子的活性;应用RT-PCR半定量法检测2种细胞中的hTERT mRNA表达水平:应用PCR-ELISA定量检测这2种细胞中的端粒酶活性。同时以端粒酶阳性的永生化人胚肾成纤维细胞系HEK293的检测结果作为阳性对照,以端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞系HELF的检测结果作为阴性对照。结果:宫颈癌细胞系HeLa和正常人皮肤表皮细胞中的hTERT启动子活性(视每种细胞中pGL3一control的启动子活性为100％)分别为20.1％和0.3％;hTERT mRNA相对表达水平分别为0.63和0(视HEK293表达水平为1):端粒酶活性分别为0.393和0.144(视>0.2为阳性)。结论:宫颈癌细胞系中hTERT启动子活性、hTERT mRNA表达水平和端粒酶活性均特异性增高,而正常皮肤表皮细胞中则受抑制或不表达。hTERT启动子活性水平与hTERT mRNA表达水平及端粒酶活性之间有显著相关性。