miR-26a-5p靶向PTEN基因影响成骨细胞分化及基质矿化

摘要：目的 探究微小RNA-26a-5p（miR-26a-5p）对第10染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因（PTEN）的靶向作用及对成骨细胞分化及基质矿化的影响。方法 通过在线软件预测miR-26a-5p与PTEN基因的结合位点，并经双荧光素酶报告基因检测验证。取生长状态良好的MC3T3-E1细胞，分为miR-26a-5p模拟物（mimic）组、miR-26a-5p mimic阴性对照（NC）组、pcDNA3.1-PTEN组、miR-26a-5p+pcDNA3.1-PTEN组，通过MTT法检测细胞增殖、碱性磷酸酶活性测定研究细胞分化情况、骨钙素定量检测分析和茜素红染色观察细胞基质矿化情况、Western blot检测成骨分化标志物和Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路蛋白表达变化。结果 与NC组比较，miR-26a-5p mimic组miR-26a-5p水平、细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、骨桥蛋白（OPN）、骨钙素、矿化率及β-catenin表达升高，PTEN mRNA及蛋白表达和糖原合成酶激酶-3b（Gsk-3b）表达降低（P＜0.05），pcDNA3.1-PTEN组PTEN mRNA及蛋白表达和Gsk-3b表达升高，细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ、OPN、骨钙素、矿化率及β-catenin表达降低（P＜0.05）；与miR-26a-5p mimic组比较，miR-26a-5p+pcDNA3.1-PTEN组PTEN mRNA及蛋白表达和Gsk-3b表达升高，细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ、OPN、骨钙素、矿化率及β-catenin表达降低（P＜0.05）。结论 miR-26a-5p可靶向下调PTEN表达，调控Wnt/β-catenin信号通路，促进成骨细胞增殖、分化及基质矿化。

Effects of miR-26a-5p on osteoblasts differentiation and matrix mineralization by targeting PTEN