环氧二十碳三烯酸、5-羟色胺与缝隙连接蛋白在慢性缺氧性肺动脉高压形成中的作用

目的 探讨环氧二十碳三烯酸(EET)、五羟色胺(5-HT)、缝隙连接蛋白40(Cx40)和43(Cx43)在慢性缺氧性肺血管收缩所致肺动脉高压中的作用。方法 选择SPF级BALB/c小鼠40只，8周龄，体重25～29 g。实验一：采用随机数字表法将小鼠分为两组：对照组(O组，n=8)和慢性缺氧模型组(H组，n=32)。所有小鼠正常饮食，O组在正常环境喂养4周，H组予低氧舱(每天吸入10%氧气10 h)喂养4周后，监测MAP和平均肺动脉压(mPAP)。随后处死小鼠，取心肺组织称量并计算右心室肥厚指数。实验二：O组和H组于显微操作下用胶原酶消化法分离远端肺小动脉血管，采用荧光免疫组化法鉴定肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动脉平滑肌细胞(PASMC)。采用随机数字表法将H组分离得PAEC和PASMC进一步分为三组：缺氧+si-Cx40组(H40组)、缺氧+si-Cx43组(H43组)和缺氧+无义siRNA组(HN组),H40组和H43组PAEC和PASMC分别接受Cx40基因和Cx43基因的特异性siRNA脂质体siPORTNeoFX转染，HN组接受无义siRNA转染。所有细胞在10%氧气条件...