银杏内酯B抑制血小板活化研究

目的探讨银杏内酯B在动物模型中的抗凝作用及对内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响。方法选择大鼠、小鼠和家兔为本次研究动物,均随机分为银杏内酯B高、中、低剂量组(各组剂量为:大鼠高剂量组60 mg/kg、中剂量组30 mg/kg、低剂量组15 mg/kg;小鼠高剂量组120 mg/kg、中剂量组60 mg/kg、低剂量组30 mg/kg;家兔高剂量32.0 mg/kg、中剂量16 mg/kg、低剂量8 mg/kg)、溶剂对照组和阳性对照阿司匹林组,连续灌胃5 d后,分别测定大鼠血流旁路血栓形成抑制率、小鼠凝血时间和家兔载体血小板聚集率。Western blot检测大鼠血小板和内皮细胞中所含的e NOS蛋白和Ser1177位磷酸化表达及NO含量。结果银杏内酯B高、中剂量均有明显抑制大鼠颈总动脉-颈外静脉血流旁路血栓的形成(q分别=9.87、4.56;P均<0.05),银杏内酯B高、中、低剂量延长小鼠凝血时间(q分别=32.02、13.58、3.98,P均<0.05);银杏内酯B各组均对血小板活化因子(PAF)、二磷酸腺苷(ADP)、血小板花生四烯酸(AA)诱导的家兔血小板聚集率有明显的抑制作用(q分别=17.26、9.46、4.91、14.67、10.18、4.91、9.51、7.01、4.44,P均<0.05);经银杏内酯B高、中剂量给药处理后,血小板中的e NOS总蛋白含量和磷酸化水平均有明显增加(q分别=19.54、9.08、28.41、11.86,P均<0.05);银杏内酯B120 mg/kg处理5 d后大鼠的循环血中NO的含量高于溶剂对照组(q=11.24,P<0.05);银杏内酯B 120μg/ml和60μg/ml处理48 h后的培养基中NO的含量高于溶剂对照组(q分别=8.36、15.68,P均<0.05)。结论银杏内酯B在大鼠、小鼠和家兔的动物模型中均表现出良好的抑制凝血的作用,银杏内酯B处理内皮细胞能激活e NOS信号通路,表明其抗凝机制与激活血小板中e NOS、增加NO释放量有关。

Inhibitional effect of ginkgolide B on platelet activation