| Hcmv-miR-UL112荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈琼娜,沈凯,黄燕燕,查瑶,方建玮,续力云,周吉航,陈芬,刘晓光.Hcmv-miR-UL112荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].医学研究杂志,2016,45(4):53-56. |
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| 作者姓名： | 陈琼娜 沈凯 黄燕燕 查瑶 方建玮 续力云 周吉航 陈芬 刘晓光 |
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| 作者单位： | 316005 舟山医院检验中心;316005 舟山医院心血管内科;316005 舟山医院细胞分子生物学实验室;325000 温州医科大学;325000 温州医科大学;316005 舟山医院细胞分子生物学实验室;316005 舟山医院细胞分子生物学实验室;325000 温州医科大学;316005 舟山医院细胞分子生物学实验室 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金资助项目(LY13H020001,LQ13H10001);浙江省公益性技术应用研究计划(2012C37036);舟山市科技计划项目(2011C32004,2012C13024) |
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| 摘 要： | 目的建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法根据miRBase网站中公布的hcmv-miRUL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性实验,同时对PCR产物进行测序验证。结果获得了1条特异性茎环反转录引物,一条特异性PCR正向引物和通用反向引物。PCR最佳反应条件为95℃10min,53℃2min;95℃15s,57℃40s,共40个循环。该方法的批内变异系数CV和批间CV均<5%,相关系数R2均>0.99,扩增效率均>90.0%。结论成功建立了一种敏感度高、特异性强、重复性好并且简便快速的hcmv-miR-UL112荧光定量qRT-PCR检测方法。
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| 关 键 词： | hcmv-miR-UL112 microRNA RT-PCR 荧光定量 |
| 收稿时间： | 2015/8/31 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2015/10/12 0:00:00 |
Development of a Fluorescent Quantitative RT-PCR assay for Hcmv-miR-UL112 |
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| Chen Qiongn,Shen Kai,Huang Yanyan.Development of a Fluorescent Quantitative RT-PCR assay for Hcmv-miR-UL112[J].Journal of Medical Research,2016,45(4):53-56. |
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| Authors: | Chen Qiongn Shen Kai Huang Yanyan |
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| Institution: | Department of Clinical Laboratory, Zhoushan Hospital, Zhejiang 316000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hcmv-miR-UL112 miRNA RT-RCR Fluorescent quantitative |
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