| 多重荧光定量RT-PCR检测高致病性H5N6禽流感病毒 |
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| 引用本文： | 马光华,崔大伟,谢国良,杨先知,高敏,车飞虎,孙海燕,陈瑜. 多重荧光定量RT-PCR检测高致病性H5N6禽流感病毒[J]. 临床检验杂志, 2016, 0(2): 81-84 |
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| 作者姓名： | 马光华 崔大伟 谢国良 杨先知 高敏 车飞虎 孙海燕 陈瑜 |
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| 作者单位： | 浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003;浙江大学医学院附属第一医院检验科，杭州 310003/浙江省临床体外诊断技术研究重点实验室，杭州 310003 |
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| 基金项目： | 浙江省医药卫生科技项目（2015KYB149）；“十二五”重大专项（2012ZX10004-210）。 |
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| 摘 要： | 目的建立一种快速检测流感病毒A型(FluA)及高致病性禽流感(HPAI)H5N6病毒感染的荧光定量RT-PCR法。方法以人细胞核糖核酸酶P(RP)基因作为临床样本的内参基因,用Primer Express 3.0软件设计PCR特异性引物和探针,建立一种检测FluA及HPAI-H5N6病毒的一步法多重荧光定量RT-PCR方法,评估其灵敏度、特异性,并与上海之江公司提供的试剂及测序法进行比较。结果建立的多重荧光定量RT-PCR法检测FluA、H5、N6及RP质粒标准品的灵敏度均达102copies/m L。各对引物和相应探针仅检测出相应的病毒,在这些病毒和常见病原分析中未发现存在交叉反应,特异性达100%。用该法检测135例临床标本,结果显示FluA为23例,未发现HPAI-H5N6病毒的感染者;与上海之江公司提供的试剂的检测结果及基因测序结果一致。结论建立的一步法多重荧光定量RT-PCR法可用于FluA及HPAI-H5N6病毒感染患者的早期诊断。
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| 关 键 词： | 甲型流感病毒；高致病性禽流感H5N6病毒；人细胞核糖核酸酶P基因；多重荧光定量RT-PCR |
| 收稿时间： | 2015-12-27 |
Detection of a highly pathogenic avian influenza H5N6 virus by the multiplex real-time RT-PCR assay |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | influenza A virus highly pathogenic avian influenza H5N6 virus human RNase P multiplex real-time RT-PCR |
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