| 摘 要： | 目的:运用基因高通量测序技术,研究补肾中药二至天癸颗粒治疗肾虚不孕患者,与安慰剂组比较用药后患者卵巢颗粒细胞基因表达的差异,研究补肾中药二至天癸颗粒对肾虚不孕患者卵巢颗粒细胞基因表达的影响,在基因水平上探讨二至天癸颗粒对肾虚不孕患者产生疗效的作用机制。方法:1选取临床上接受IVF-ET治疗的肾虚不孕患者66例,按照随机数字表法分成治疗组33例,对照组33例。2两组均在IVF治疗前两个周期及治疗当周期服用药物,治疗组服用二至天癸颗粒,对照组服用安慰剂颗粒;两组均采用目前IVF治疗中常规应用的控制性超排卵方案长方案,在取卵日收集废弃的卵巢颗粒细胞并提取RNA。运用基因高通量测序技术Hiseq 2000分析,比较治疗组与对照组的基因表达的差异。3结合bowtie2软件分析,并使用检索互联网生物学公共数据库提供的检索程序对差异表达基因进行分析,最后对差异表达基因进行GO注释,并利用KEGG作pathway析。结果:1治疗组与对照组患者的卵巢颗粒细胞存在表达差异基因,获得表达差异基因共422条(P0.05)。其中,治疗组较对照组表达水平上调(FC2)的有103条,表达水平下(FC0.5)的有319条。2将差异表达基因按功能分析进行大体分类,涉及细胞凋亡、生物合成等方面。结论:1基因高通量测序技术是研究中药对人体作用的一种理想的技术方法。2补肾中药可以影响肾虚不孕患者的基因表达,这为补肾中药改善生殖功能作用的机制提供基因水平上的理论依据。
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