内质网应激凋亡途径对H9C2细胞缝隙连接蛋白43表达的影响及稳心颗粒的干预研究

目的：研究内质网应激凋亡途径对大鼠心肌H9C2细胞缝隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响及稳心颗粒的干预作用。方法：体外培养H9C2细胞，分为对照组、模型组、salubrinal（Sal）组、稳心颗粒组；采用毒胡萝卜素（TG）诱导内质网应激凋亡模型，以经典凋亡抑制剂Sal抑制凋亡，采用CCK-8比色分析法筛选药物浓度及时间，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blotting法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C/EBP-同源蛋白（CHOP）、天冬氨酸胱氨酸特异性蛋白酶-12（Caspase-12）、Cx43的表达。结果：CCK-8结果提示，TG、Sal和稳心颗粒的最佳浓度分别为0.1、20 μmol·L-1和10 g·L-1，作用时间均为24 h。流式细胞仪检测结果显示，与对照组比较，其余3组的细胞凋亡率显著增加；与模型组比较，Sal组及稳心颗粒组的细胞凋亡率都明显下降。Western blotting结果中，与对照组比较，模型组细胞GRP78、CHOP及Caspase-12蛋白表达水平显著增高，而Cx43蛋白表达水平显著降低；与模型组比较，Sal组和稳心颗粒组细胞CHOP、Caspase-12蛋白表达水平显著降低，Cx43蛋白表达水平显著升高，Sal组细胞GRP78蛋白表达差异无统计学意义，稳心颗粒组GRP78蛋白表达水平显著升高。结论：TG诱导的内质网应激凋亡途径会影响Cx43的表达，稳心颗粒可以通过抑制内质网应激凋亡途径调节H9C2细胞Cx43的表达水平。

Effects of Wenxin Granules on ER Stress Apoptotic Pathway of H9C2 Cell and Expression of Connexin 43