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稳定表达人巨细胞病毒pUL49蛋白人胚肺成纤维细胞系的建立
引用本文:宫君原,肖小平,员月明,李月琴,张欣,邹弈,李弘剑,周天鸿. 稳定表达人巨细胞病毒pUL49蛋白人胚肺成纤维细胞系的建立[J]. 中国现代医学杂志, 2010, 20(23)
作者姓名:宫君原  肖小平  员月明  李月琴  张欣  邹弈  李弘剑  周天鸿
作者单位:暨南大学生命科学技术学院,广东,广州,510632
基金项目:国家自然科学基金重大计划面上项目(No:90608024),国家自然科学基金面上项目(No:30770106)
摘    要:目的 用逆转录病毒载体介导的基因转移方法,建立稳定表达人巨细胞病毒(HCMV)UL49基因的HELF细胞系.方法 首先应用KT-PCR从感染HCMV的HELF细胞RNA中扩增UIA9基因,克隆到逆转录病毒载体pLEGFP-N1上,以此构建重组逆转录病毒栽体pLEGFP-N1-FLAG-uL49,并转染AmphoPackTM-293细胞,收集逆转录病毒,感染HELF细胞,经G418抗性筛选出阳性细胞.结果 经IFA、KT-PCK及Wcstem blot检测到UIA9基因在稳定细胞系中表达.结论 HELF-PLEGFP-N1-FLAG-UL49稳定细胞系构建成功.此细胞系为进一步研究HCMV pUL49蛋白的功能提供了一个有力工具.

关 键 词:人巨细胞病毒  逆转录病毒  稳定细胞系

Construction of HCMV UL49 recombinant retroviral vector and establishment of stable cell line
GONG Jun-yuan , XIAO Xiao-ping , YUAN Yue-ming , LI Yue-qin , ZHANG Xin , ZOU Yi , LI Hong-jian , ZHOU Tian-hong. Construction of HCMV UL49 recombinant retroviral vector and establishment of stable cell line[J]. China Journal of Modern Medicine, 2010, 20(23)
Authors:GONG Jun-yuan    XIAO Xiao-ping    YUAN Yue-ming    LI Yue-qin    ZHANG Xin    ZOU Yi    LI Hong-jian    ZHOU Tian-hong
Affiliation:GONG Jun-yuan,XIAO Xiao-ping,YUAN Yue-ming,LI Yue-qin,ZHANG Xin,ZOU Yi,LI Hong-jian,ZHOU Tian-hong(College of Life Science and Technology,Jinan University,Guangzhou,Guangdong 510632,P.R.China)
Abstract:
Keywords:human cytomegalovirus  retrovirus  stable cell line  
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