| 胃癌细胞中p21活化激酶4的表达和定位 |
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| 引用本文： | 邵阳光,李妍,王春玉,佟宇鑫,李丰.胃癌细胞中p21活化激酶4的表达和定位[J].中国医科大学学报,2009,38(8). |
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| 作者姓名： | 邵阳光 李妍 王春玉 佟宇鑫 李丰 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学,基础医学院细胞生物学教研室,卫生部细胞生物学重点实验室,沈阳,110001
2. 中国医科大学,第90期生物科学与生物技术系,沈阳,110001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，中国博士后科学基金资助项目，辽宁省教育厅科研基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建真核表达载体pEGFP-PAK4,利用它鉴定p21活化激酶4(PAK4)在胃癌细胞中的定位,并检测外源性和内源性PAK4在胃癌细胞中的表达.方法 以pCAN2-MYC-PAK4为模板,采用PCR法进行人PAK4编码序列的扩增,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1中.将pCAN2-MYC-PAK4质粒瞬时转染到胃癌BGC-823细胞中,用Western blot方法检测MY-PAK4融合蛋白的表达;并用Western blot方法检测不同胃癌细胞系中内源性PAK4的表达;瞬时转染pEGFP-PAK4到胃癌BGC-823细胞中,用激光扫描共聚焦显微镜观察PAK4的定位.结果 (1)hPAK4编码序列被成功克隆至真核表达载体pEGFP-C1中;(2)证实了MYC-PAK4融合蛋白及内源性PAK4在胃癌细胞中的表达;(3)转染pEGFP-PAK4后,在胃癌BGC-823细胞胞质内可见明亮的绿色荧光.结论 成功地构建了pEGFP-PAK4载体,证实了外源性和内源性PAK4的表达,证明在胃癌BGC-823细胞中PAK4主要定位于细胞质,为进一步研究PAK4的生物学特性及其信号转导通路奠定了基础.
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| 关 键 词： | p21活化激酶4 绿色荧光蛋白 融合蛋白 转染 胃癌 |
Expression and Localization of p21-activated Kinase 4 in Gastric Cancer Cells |
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| SHAO Yang-guang
,
Li Yan
,
WANG Chun-yu
,
TONG Yu-xin
,
LI Feng.Expression and Localization of p21-activated Kinase 4 in Gastric Cancer Cells[J].Journal of China Medical University,2009,38(8). |
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| Authors: | SHAO Yang-guang Li Yan WANG Chun-yu TONG Yu-xin LI Feng |
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