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hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位
引用本文:蔡鑫泽,顾卉,刘彤,李丰. hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位[J]. 中国医科大学学报, 2009, 38(11)
作者姓名:蔡鑫泽  顾卉  刘彤  李丰
作者单位:1. 中国医科大学附属第一医院中心实验室,沈阳,110001
2. 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室,卫生部细胞生物学重点实验室,沈阳110001
基金项目:国家自然科学基金资助项目
摘    要:目的 构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞---HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位.结果 hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471 bp.Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45 kDa.pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达.结论 成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内.

关 键 词:hLMO1基因  质粒构建  基因表达与定位

Construction of the Recombinant Plasmid of Human LMO1 Gene and the Expression and Localization of Fusion Protein
CAI Xin-ze , GU Hui , LIU Tong , LI Feng. Construction of the Recombinant Plasmid of Human LMO1 Gene and the Expression and Localization of Fusion Protein[J]. Journal of China Medical University, 2009, 38(11)
Authors:CAI Xin-ze    GU Hui    LIU Tong    LI Feng
Abstract:
Keywords:LIM domain only 1 gene  plasmid construction  gene expression and localization
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