| 偶联多种单链抗体免疫纳米微粒的制备方法及鉴定 |
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| 引用本文： | 邹金茂,李若梦,练国达,陈少杰,陈茵婷,黄开红.偶联多种单链抗体免疫纳米微粒的制备方法及鉴定[J].岭南现代临床外科,2019,19(2):154-161,168. |
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| 作者姓名： | 邹金茂 李若梦 练国达 陈少杰 陈茵婷 黄开红 |
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| 作者单位： | 中山大学孙逸仙纪念医院消化科,广州,510120;中山大学孙逸仙纪念医院消化科,广州,510120;中山大学孙逸仙纪念医院消化科,广州,510120;中山大学孙逸仙纪念医院消化科,广州,510120;中山大学孙逸仙纪念医院消化科,广州,510120;中山大学孙逸仙纪念医院消化科,广州,510120 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;广东省自然科学基金自由申请项目;广东省自然科学基金自由申请项目;广东省医学科研基金;广东省医学科研基金;广州市产学研协同创新重大专项;广州市珠江科技新星专项;中央高校基本科研业务费专项 |
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| 摘 要： | 目的建立一种多单链抗体修饰氧化铁纳米微粒的方法。方法利用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)及羧基(COOH group)修饰的氧化铁纳米微粒(Iron OxideNanoparticles,IONPs),以及抗MUC4、抗CEACAM6及抗CD44v6单链抗体(Single chain antibodies,scAbs),通过EDC/Sulfo-NHS交联剂将IONPs-PEG与3种scAbs进行交联,构建IONPs-PEG-multiscAbs复合物,再利用zeta粒度仪、透射电子显微镜(TEM)对IONPs-multi scAbs复合物进行表征,同时,在IONPs-PEG表面偶联荧光抗体,通过荧光强度测定其偶联效率;再鉴定复合物的抗原识别特异性及在放置1个月、6个月后评估复合物水溶液稳定性。结果偶联3种scAbs后,IONPs-PEG-multi scAbs复合物的平均粒径为(23.6±0.5)nm,粒径分布集中,zeta电位约(-17.3±06)m V;TEM显示粒径约10 nm,荧光强度测定结果提示抗体偶联效率约为75%,细胞免疫荧光实验结果提示IONPs-PEG-multi scAbs复合物对高表达MUC4、CEACAM6及CD44v6分子的胰腺癌细胞BxPC-3具有特异性识别能力,证实该复合物具有良好的抗原识别特异性;在放置1个月、6个月后,偶联复合物的溶液分散性良好,放置6个月后平均粒径约(23.9±0.8)nm,zeta电位约(-17.6±0.4)mV,TEM拍照提示粒径约10 nm,细胞免疫荧光提示复合物抗原识别特异性良好。结论本研究利用EDC/Sulfo-NHS交联剂组合,将3种单链抗体交联到PEG和羧基修饰的IONPs表面,构建IONPs-PEG-multi scAbs复合物,该方法偶联效率高,且复合物具有粒径小、分散性好、抗原识别特异性及水溶液稳定性好的特性。
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| 关 键 词： | 纳米微粒 多种单链抗体 表面修饰 方法 |
Preparation and identification of multi single chain antibodies modified immune nanoparticles |
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| ZOU Jinmao,LI Ruomeng,LIAN Guoda,CHEN Shaojie,CHEN Yinting,HUANG Kaihong.Preparation and identification of multi single chain antibodies modified immune nanoparticles[J].Lingnan Modern Clinics in Surgery,2019,19(2):154-161,168. |
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| Authors: | ZOU Jinmao LI Ruomeng LIAN Guoda CHEN Shaojie CHEN Yinting HUANG Kaihong |
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| Institution: | (Department of Gastroenterology,Sun Yat-Sen Memorial Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou,510120,China) |
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| Abstract: | ZOU Jinmao;LI Ruomeng;LIAN Guoda;CHEN Shaojie;CHEN Yinting;HUANG Kaihong(Department of Gastroenterology,Sun Yat-Sen Memorial Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou,510120,China) |
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| Keywords: | nanoparticles multi single chain antibody modification method |
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