抑制自噬对缺氧复氧后H9c2心肌细胞损伤及线粒体Cx43变化的影响 |
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引用本文: | 卢青,李兆康,李志刚,陈志楠,付文波,丁世芳. 抑制自噬对缺氧复氧后H9c2心肌细胞损伤及线粒体Cx43变化的影响[J]. 中华老年心脑血管病杂志, 2019, 0(10) |
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作者姓名: | 卢青 李兆康 李志刚 陈志楠 付文波 丁世芳 |
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作者单位: | 中国人民解放军中部战区总医院心血管内科;南方医科大学武汉临床医学院 |
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摘 要: | 目的研究缺氧复氧(HR)后,抑制自噬对H9c2心肌细胞损伤的影响,同时观察线粒体Cx43含量及磷酸化水平的变化,探讨抑制自噬对HR心肌损伤的影响及可能机制。方法通过缺氧12h、复氧12h建立H9c2心肌细胞HR模型。随机将H9c2心肌细胞分为5组:对照组、HR组、格尔德霉素(GA)组、3甲基腺嘌呤(3-MA)组、GA+3-MA组。分别测定各组细胞活力、线粒体膜电位以及人卷曲螺旋-肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、线粒体Cx43、线粒体磷酸化Cx43蛋白水平和自噬体含量。结果与对照组比较,HR组漂浮的死亡细胞增多、存活心肌细胞密度减少,细胞存活率和活力、线粒体膜电位下降,乳酸脱氢酶水平升高(P0.05)。与HR组比较,GA组、3-MA组和GA+3-MA组线粒体膜电位、细胞活力均下降(P0.05);GA+3-MA组线粒体膜电位、细胞活力均分别低于GA组和3-MA组(P0.05)。与对照组相比,HR组自噬体增多、自噬相关蛋白Beclin-1水平和LC3BⅡ/LC3BⅠ均升高(P0.05);与HR组比较,GA组、3-MA组和GA+3-MA组自噬体减少、Beclin-1水平GA、LC3BⅡ/LC3BⅠ均下降(P0.05);GA+3-MA组Beclin-1水平、LC3BⅡ/LC3BⅠ均分别低于GA组和3-MA组(P0.05)。与对照组比较,HR组线粒体Cx43及磷酸化Cx43蛋白均下降(P0.05);GA组和GA+3-MA组线粒体Cx43蛋白低于HR组(P0.05);GA组、3-MA组和GA+3-MA组线粒体磷酸化Cx43蛋白低于HR组(P0.05);GA+3-MA组线粒体磷酸化Cx43蛋白分别低于GA组和3-MA组(0.18±0.04 vs 0.27±0.06,0.33±0.05,P0.05)。结论 HR导致线粒体Cx43含量及磷酸化水平下降,心肌细胞出现缺血再灌注损伤,同时自噬激活。而抑制自噬,使HR后线粒体Cx43脱磷酸化加剧,进一步加重HR心肌细胞损伤。
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关 键 词: | 缺氧 自噬 肌细胞,心脏 线粒体 膜电位,线粒体 再灌注损伤 |
Effect of autophagy inhibition on H9c2 cardiomyocyte injury and mitochondrial Cx43 after hypoxia and reoxygenation |
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Abstract: | |
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