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颗粒溶素对U937细胞分泌MCP-1、RANTES与TNF-α功能的影响
作者姓名:黄东标  胡晓燕  钱(王争  陈燕  周晔  陈波  邓安梅  仲人前
作者单位:磐安县人民医院检验科,浙江磐安,322300;第二军医大学长征医院实验诊断科,全军临床免疫中心,上海200003
基金项目:上海市科技攻关项目,上海市科研项目,上海市青年科技启明星计划,上海市科委资助项目
摘    要:目的 探讨颗粒溶素对U937细胞分泌MCP-1、RANTES与TNF-α功能的影响.方法 ①在U937细胞中加入终浓度为100 ng/ml的乙酰肉豆蔻佛波酯(phorbol mynstate acetate,PMA),刺激2 d后,再加入不同组合的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、葡萄球菌的脂膜酸(lipoteichoic acid,ETA)、颗粒溶素(granulysin,GNLY),刺激培养4 h后收集细胞上清,用ELISA检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的含量.②在U937细胞或原代单核细胞中加入GNLY后,在37℃条件下,刺激4 h,收集上清,以ELISA分析MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1,单核细胞趋化因子-1)和RANTES(reduced upon acti-vation normal T expression and secreted,正常T细胞活化时表达和分泌减少因子)的含量;收集细胞并抽提总RNA后,以实时荧光定量RT-PCR方法检测部分基因表达水平的改变.结果 加入GNLY后,LPS诱导U937细胞分泌的TNF-α水平显著增加(P<0.05);U937细胞或单核细胞的MCP-1、RANTES的mRNA水平显著增加(P<0.05),上清液中MCP-1和RANTES水平也增加(P<0.05).结论 GNLY可促进LPS诱导单核细胞分泌TNF-α,本身可刺激单核细胞表达MCP-1、RANTES增高,这为以后进一步研究颗粒溶素的作用机制打下了基础.

关 键 词:颗粒溶素  单核细胞  单核细胞趋化因子-1  正常T细胞活化时表达和分泌减少因子  肿瘤坏死因子-α
文章编号:1001-764X(2008)03-0173-03
修稿时间:2007-05-10
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