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半固体脱钙对骨性材料内部绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞的研究
引用本文:江 汕,江千里,裴国献,赵培冉.半固体脱钙对骨性材料内部绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞的研究[J].南京医科大学学报,2009,29(4):450-453482.
作者姓名:江 汕  江千里  裴国献  赵培冉
作者单位:江汕,裴国献,赵培冉,JIANG Shan,PEI Guo-xian,ZHAO Pei-ran(南方医科大学南方医院创伤骨科,广东广州,510515);江千里,JIANG Qian-li(南方医科大学南方医院血液科,广东广州,510515)  
基金项目:国家自然科学基金,广东省自然科学基金骨髓瘤课题,南方医院院长基金 
摘    要:目的:通过试制半固体脱钙体系,建立在坚硬、透光性差的骨性材料内部观察、研究荧光基因标记细胞的方法.方法:靶细胞以携带绿色荧光蛋白的重组慢病毒载体标记后,接种于骨性生物支架材料内部;负载荧光细胞的生物材料经多聚甲醛固定后,研究不同脱钙剂对细胞荧光的影响;负载荧光细胞的生物材料经自创的半固体脱钙体系脱钙后,制备冰冻切片,并与塑料包埋切片、常规石蜡切片比较.结果:荧光倒置显微镜可以观察到在生物材料内部生长的绿色荧光细胞.骨性材料在半固体脱钙过程中,荧光倒置显微镜可以观察到,材料中不透光的坚硬钙质成分逐渐消失,而细胞在原位保持形态和荧光;以不脱钙塑料包埋切片为对照,半固体脱钙和随后的冰冻切片可原位精细保持细胞的荧光和形态,且可适用于大块骨性组织.结论:本研究采用自行试制的半固体脱钙体系,可原位保留骨性材料内部生长细胞的位置、形态和荧光,为进行骨性材料内部结构及功能的相关研究提供依据.

关 键 词:半固体脱钙  骨性生物材料  骨髓间充质干细胞  绿色荧光蛋白

Study of GFP modified bone marrow mesenchyma stem cells in bone bio-scaffold by semi-solid decalcification system
JIANG Shan,JIANG Qian-li,PEI Guo-xian and ZHAO Pei-ran.Study of GFP modified bone marrow mesenchyma stem cells in bone bio-scaffold by semi-solid decalcification system[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2009,29(4):450-453482.
Authors:JIANG Shan  JIANG Qian-li  PEI Guo-xian and ZHAO Pei-ran
Institution:Department of Orthopedics and Trauma;Nanfang Hospital;1Department of Hematological;Nanfang hospital;Nanfang Medical University;Guang zhou 510515;China
Abstract:
Keywords:semi-solid decalcification  bone bio-scaffold  bone marrow mesenchyma stem cell  green fluorescence protein  
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