应用高葡萄糖钳夹技术评估高糖喂养小鼠胰岛细胞功能

目的利用高葡萄糖钳夹技术探讨高糖喂养小鼠胰岛B细胞功能。方法将16只4周龄C57BL／6J品系小鼠随机数字表法分为2组（各8只），分别用高糖与普通饲料喂养，8周后行腹腔葡萄糖耐量实验比较2组小鼠葡萄糖耐量，行胰岛素耐量实验比较2组小鼠外周组织对胰岛素的敏感性，应用高葡萄糖钳夹技术比较模型小鼠在体胰岛β细胞第1时相和第2时相胰岛素分泌改变。钳夹实验结束3～4d后麻醉动物，取小鼠肝脏，利用庚烷-异丙醇-吐温的方法提取肝脏内甘油三酯及总胆固醇。组间数据比较采用t检验。结果喂养10周时，高糖组小鼠体质量（18．0±0．8）g]低于普食组（23．6±0．5）g]，2组差异有统计学意义（扭5．595，P〈0．05）。高糖组糖耐量曲线下面积为（103±3）mmol／L，显著高于普食组的（91±3）mmol／L（t=2．487，P〈0．05）。普食组葡萄糖利用指数（KITT）与高糖组差异无统计学意义（分别为0．53±0．08和0．54±0．14，t=2．360，P〉0．05）。高葡萄糖钳夹显示，高糖组第1时相胰岛素水平较普食组下降了49．6％分别为（0．71±0．26）和（I．41±0．44）μg/L；t=2．943，P〈0．05]；高糖组平均葡萄糖输注率为（6．8±2．2）mg·kg-1·min-1，也较普食组的（20．2±2．3）mg·kg-1·min-1降低了66．3％（t=4．206，P〈0．05）。结论高糖喂养早期（8周），小鼠发生葡萄糖耐量降低，主要为胰岛β细胞第1时相胰岛素分泌减弱所致，并非外周胰岛素敏感性改变引起。