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重组hTGF-β1基因转染骨髓间充质干细胞及其表达
引用本文:夏万尧,丁文龙,刘伟,钟梅芳,王丹茹,周广东,崔磊,曹谊林.重组hTGF-β1基因转染骨髓间充质干细胞及其表达[J].上海交通大学学报(医学版),2007,27(10).
作者姓名:夏万尧  丁文龙  刘伟  钟梅芳  王丹茹  周广东  崔磊  曹谊林
作者单位:1. 上海交通大学,医学院第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011
2. 基础医学院人体解剖学教研室,上海,200025
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:目的 探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其表达的可行性.方法 重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染猪BMSCs.转染后72 h,RT-PCR检测BMSCs的hTGF-β1mRNA表达;免疫细胞化学染色定性和酶联免疫吸附定量测定(ELISA法)hTGF-β1蛋白表达;MTT法测定水貂肺上皮细胞(MV-1-Lu)的生长抑制率,以验证转染后所表达的hTGF-β1蛋白的生物学活性.结果 转染后72 h,BMSCs能有效表达hTGF-β1mRNA,胞浆内有大量棕黄色的hTGF-β1蛋白表达,其蛋白表达量是转染adeno-lacZ的2.65倍(P<0.05);MTT法检测结果显示,转染adeno-hTGF-β1的BMSCs所分泌的hTGF-β1蛋白对MV-1-Lu细胞的生长有显著抑制作用.结论 重组adeno-hTGF-β1能够被导入BMSCs,并表达有生物学活性的hTGF-β1蛋白.为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程中的应用奠定了基础.

关 键 词:骨髓间充质干细胞  基因转染  腺病毒  人转化生长因子β1

Bone marrow stromal cells transfected with adeno-hTGF-β1 and expression of hTGF-β1
XIA Wan-yao,DING Wen-long,LIU Wei,ZHONG Mei-fang,WANG Dan-ru,ZHOU Guang-dong,CUI Lei,CAO Yi-lin.Bone marrow stromal cells transfected with adeno-hTGF-β1 and expression of hTGF-β1[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2007,27(10).
Authors:XIA Wan-yao  DING Wen-long  LIU Wei  ZHONG Mei-fang  WANG Dan-ru  ZHOU Guang-dong  CUI Lei  CAO Yi-lin
Abstract:
Keywords:
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