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钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究
引用本文:孙成铭,黄世峰,罗红伟,刘钉宾,田文君,朱喜丹,冯文莉,涂植光,温健萍,黄宗干.钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究[J].第三军医大学学报,2009,31(4).
作者姓名:孙成铭  黄世峰  罗红伟  刘钉宾  田文君  朱喜丹  冯文莉  涂植光  温健萍  黄宗干
作者单位:1. 重庆医科大学,医学检验系临床血液学教研室,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室、重庆市重点实验室,重庆,400016
2. Canadian Blood Services, Hamilton, ON L8S IH8, Canada
3. 重庆医科大学,附属第一医院血液科,重庆,400016
摘    要:目的 研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制.方法 将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株.瑞氏染色观察细胞形态,台盼蓝拒染法和MTT法检测K562细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,电镜观察细胞凋亡,RT-PCR及Western blot方法 检测该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53、cyclin B1和c-myc等的表达.结果 筛选到稳定表达Per基因的稳定表达细胞株K562/Per2细胞,与空载体转染组及未处理对照组细胞相比,K562/Per2细胞体积缩小,但是分化不明显;台盼蓝拒染法和MTT实验发现Per2抑制细胞生长与增殖能力;流式细胞仪检测周期结果 K562/Per2细胞中G2期细胞增多转染组(36.1±5.5)%,空载组(12.5±2.9)%,未处理对照组(9.7±2.3)%,P<0.05],凋亡检测显示转染组细胞凋亡明显增加14.8%P<0.05];电镜结果 显示染色质浓集、断裂,核固缩和凋亡小体;RT-PCR及Western blot显示Per2明显上调p53基因的mRNA和蛋白表达,而抑制cyelin B1、c-myc基因mR-NA和蛋白的表达.结论 钟基因Per2能抑制K562细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,但对分化无明显作用.其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的.

关 键 词:钟基因  增殖  凋亡  细胞周期  节律调节

Mechanism research and effects of clock gene Per2 in K562 leukemia cells on their proliferation, differentiation and apoptosis
SUN Cheng-ming,HUANG Shi-feng,LUO Hong-wei,LIU Ding-bin,TIAN Wen-jun,ZHU Xi-dan,FENG Wen-li,TU Zhi-guang,WEN Jian-ping,HUANG Zong-gan.Mechanism research and effects of clock gene Per2 in K562 leukemia cells on their proliferation, differentiation and apoptosis[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2009,31(4).
Authors:SUN Cheng-ming  HUANG Shi-feng  LUO Hong-wei  LIU Ding-bin  TIAN Wen-jun  ZHU Xi-dan  FENG Wen-li  TU Zhi-guang  WEN Jian-ping  HUANG Zong-gan
Abstract:
Keywords:
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