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| 腺病毒载体表达轮状病毒G1型外壳蛋白VP7及其诱导的免疫应答研究 | |
| 作者单位： | ;1.昆明学院医学院;2.中国医学科学院医学生物学研究所;3.北京协和医学院;4.云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 |
| 摘 要： | 构建表达地方流行株轮状病毒G1型外壳蛋白VP7的复制缺陷型重组腺病毒,免疫小鼠评价其体液及细胞免疫反应效果,探讨基因工程轮状病毒疫苗的实验基础及可行性。RT-PCR扩增轮状病毒VP7基因并克隆至pshuttle-CMV穿梭质粒,pshuttle-VP7与腺病毒骨架质粒同源重组后转染293细胞包装重组腺病毒rAd-VP7。RT-PCR、western blot检测rAdVP7在体外细胞中的转录及表达。rAd-VP7经肌注或滴鼻免疫小鼠后检测其血清IgG、肠道IgA及中和抗体效价;流式、ELISPOT检测淋巴细胞亚群变化及IFN-γ分泌情况。结果显示ELISA可检测到免疫小鼠血清IgG和滴鼻组肠道IgA抗体的产生;肌注和滴鼻免疫组中和抗体平均滴度分别为228和322.5;免疫小鼠脾细胞IFN-γ的分泌增加。表达轮状病毒VP7的重组腺病毒不但能够激发体液及细胞免疫反应,滴鼻免疫途径还可诱导粘膜免疫应答。 |
| 关 键 词： | 轮状病毒 VP7 重组腺病毒 免疫原性 |
Immunogenicity evaluation of a recombinant adenovirus expressing rotavirus outer capsid protein VP7 of serotype G1 in mice |
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