| 突变型脑红蛋白原核表达载体的构建与表达鉴定 |
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| 引用本文： | 李伟光,吴永红,任长虹,高艳,张成岗. 突变型脑红蛋白原核表达载体的构建与表达鉴定[J]. 军事医学科学院院刊, 2011, 35(1) |
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| 作者姓名： | 李伟光 吴永红 任长虹 高艳 张成岗 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家973计划项目，国家科技重大专项课题，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 为了研究脑红蛋白(neuroglobin, Ngb)发挥神经保护功能的作用机制,拟构建Ngb中关键氨基酸His突变的原核表达载体,并对其进行诱导表达与鉴定.方法 利用引物突变法和PCR技术,扩增出突变型Ngb的cDNA,并克隆到原核表达载体pBV220,经测序鉴定正确转化到大肠杆菌HB101;对突变型Ngb蛋白进行诱导表达,产物经SDS-PAGE和Western印迹进行鉴定.结果 与结论成功构建了pBV220-Ngb(H64V)和pBV220-Ngb(H96A)原核表达载体,SDS-PAGE和Western印迹检测结果显示突变型Ngb能够正常表达,为进一步揭示脑红蛋白神经保护功能与作用机制奠定了重要基础.
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| 关 键 词： | 脑红蛋白 神经保护 突变 原核表达 引物突变法 氨基酸类 聚合酶链反应 大肠杆菌 基因表达 |
Construction and expression of a prokaryotic vector for mutant human neuroglobin |
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| LI Wei-guang,WU Yong-hong,REN Chang-hong,GAO Yan,ZHANG Cheng-gang. Construction and expression of a prokaryotic vector for mutant human neuroglobin[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2011, 35(1) |
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| Authors: | LI Wei-guang WU Yong-hong REN Chang-hong GAO Yan ZHANG Cheng-gang |
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