小干扰RNA技术对沉默乳腺细胞中DEK基因的表达及乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨小干扰RNA技术对沉默乳腺细胞中DEK基因的表达及乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响,为乳腺癌的分子诊断及靶向治疗奠定理论基础。方法以人类正常乳腺癌细胞系Hs578Bst作为对照,蛋白质印迹(Western bloting)检测MCF-7、T47D、MDA-MB-231、BT549乳腺癌细胞中DEK蛋白表达;MCF-7细胞分为空白组、阴性对照组、DEK转染组,转染48 h后,Western bloting检测DEK、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Notch1、Hes1蛋白表达;CCK8实验和流式细胞术分别检测细胞的增殖及凋亡情况。结果 DEK基因在MCF-7、T47D、MDA-MB-231、BT549细胞中的相对表达量均显著高于Hs578Bst,差异有统计学意义(均P0.01);RNA干扰可显著降低乳腺癌细胞DEK的蛋白相对表达量;阴性对照组细胞存活率、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3、Notch1、Hes1蛋白相对表达量与空白组差异无统计学意义(均P0.05),DEK转染组细胞存活率及Notch1、Hes1蛋白相对表达量显著低于空白组,细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著高于空白组,差异有统计学意义(均P0.01)。结论抑制乳腺癌细胞DEK基因表达可显著降低癌细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调Notch1信号通路有关。