| 树鼩腺病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 宋庆凯,李晓飞,苗雨润,张志成,王璇,袁圆,代解杰,孙晓梅.树鼩腺病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国比较医学杂志,2018(3). |
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| 作者姓名： | 宋庆凯 李晓飞 苗雨润 张志成 王璇 袁圆 代解杰 孙晓梅 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队; |
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| 摘 要： | 目的通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒。方法根据TAV全基因组3’端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。结果建立的TAV实时荧光定量PCR检测方法特异性好,与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应;方法的最低检测限度为每微升3.7拷贝,灵敏性强;相关检测系数R2为0.998,扩增效率为95.7%;扩增结果具有良好的线性关系,且重复性检测效果好。结论成功建立了TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,灵敏度高,重复性好,可用于TAV感染的早期快速检测。
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