孕妇外周血中SRY基因检测在产前诊断中的应用

目的：本文旨在探索使用套式PCR的方法，对通过密度梯度离心所得母体外周血中的胎儿细胞SRY基因片断进行检测，用以评估基因检测在早期判定胎儿性别方面的准确性，从而为利用孕妇血中胎儿细胞进行无创性产前基因诊断奠定基础。方法：采取正常妊娠10－20周孕妇外周血，经密度梯度离心后收集各层细胞，并分别提取其中的DNA，然后使用套式PCR的方法对SRY基因进行检测，并将结果与胎儿性别进行比较，用以评估套式PCR检测SRY基因在早期判定胎儿性别中的准确性和可行性。结果：共检测10例孕妇，有7例套式PCR扩增出SRY,其中有6例证实是男胎，男性性别预测符合率为85.7%(6/7)；未扩增出SRY基因的3例均证实为女性，女性预测符合率为100％（3／3）。在套式PCR扩增第一轮中，除阳性对照外所有细胞均未扩增出SRY基因，而第二轮PCR后，部分细胞扩增出SRY基因。结论：（1）孕妇外周血中存在有胎儿细胞，密度梯度离心法可对其中的胎儿细胞起一定的分离富集作用，富集到的胎儿细胞主要集中在中层，但含量较少，要用于临床检测，还需进行进一步的富集和纯化。（2）应用套式PCR能够检测到从母体外周血中所富集到胎儿细胞中的SRY基因，且对预测胎儿性别有较高的准确度，尤其是女性胎儿的判定，而在对男性胎儿的判定方面应注意外源性男性DNA的污染。