|
|||||
|
|
| 牙齿发育相关基因adam28多克隆抗体的制备及鉴定 | |
| 引用本文： | 赵征,文玲英,金岩,杨曦,轩东英. 牙齿发育相关基因adam28多克隆抗体的制备及鉴定[J]. 实用口腔医学杂志, 2006, 22(2): 166-170 |
| 作者姓名： | 赵征 文玲英 金岩 杨曦 轩东英 |
| 作者单位： | 1. 西安第四军医大学口腔医学院儿童口腔科,710032 2. 西安第四军医大学组织工程研发中心 3. 西安第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室 |
| 摘 要： | 目的制备及鉴定抗ADAM28的多克隆抗体。方法采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增出adam28基因的蛋白编码区序列,克隆到中间载体pMD18-T Vector中,再经双酶切得到adam28片段定向克隆到pGEX-4T-1载体中,构建融合表达载体pGEX-4T-adam28,在大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,得到GST-ADAM28融合蛋白,经过初步纯化及SDS-PAGE电泳,在35300的新蛋白带处直接割胶,作为抗原免疫新西兰大白兔后获取抗体。结果成功构建融合表达载体pGEX-4T-adam28,得到初步纯化的GST-ADAM28融合蛋白,免疫兔子1个月后,获得免疫血清,盐析法纯化得到多克隆抗体。Western印迹结果显示所得到的抗体具有较高的特异性,ELISA分析证实其效价可达1∶16000。结论成功制备出高效价的抗ADAM28多克隆抗体,为进一步研究ADAM28在牙齿发育中的作用和表达分布奠定基础。 |
| 关 键 词： | adam28基因 融合蛋白 多克隆抗体 免疫印迹 |
| 文章编号： | 1001-3733(2006)-02-0166-05 |
| 收稿时间： | 2005-05-20 |
| 修稿时间： | 2005-07-06 |
Preparation and identification of a polyclonal antibody against tooth development related gene-adam28 product |
|
| Zhao Zheng, Wen Lingying,Jin Yan,et al.. Preparation and identification of a polyclonal antibody against tooth development related gene-adam28 product[J]. Journal of Practical Stomatology, 2006, 22(2): 166-170 | |
| Authors: | Zhao Zheng Wen Lingying Jin Yan et al. |
| Affiliation: | Zhao Zheng, Wen Lingying,Jin Yan, et al. |
| Abstract: | |
| Keywords: | adam28 gene Fusion protein Polyclonal antibody Western blot |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |