| 摘 要： | 背景:目前细胞移植是修复脊髓损伤的研究热点之一,许旺细胞能够分泌多种神经营养因子,改善损伤局部微环境,大量相关文献证实了其能够促进脊髓损伤后功能的恢复。针对治疗脊髓损伤的细胞移植方法很多,其中静脉移植具有操作方便、能够避免传统移植方法造成的附加损伤等优点。目的:探讨许旺细胞尾静脉移植修复大鼠脊髓损伤的疗效。方法:体外分离Wistar大鼠双侧坐骨神经,植块法培养,S-100染色鉴定,Hoechst33342标记许旺细胞。Impactor model-Ⅱ打击仪制作Wistar大鼠T10脊髓损伤模型60只,随机分为3组,空白对照组术后未作处理,DMEM对照组、许旺细胞移植组术后1周分别尾静脉注射1mLDMEM或1mL许旺细胞。术前1d,术后1,3d,1周及以后每周进行BBB评分。移植后1,2,4周取材行冰冻切片观察移植许旺细胞的迁移。移植后8周取材行苏木精-伊红染色及免疫荧光染色观察损伤段胶质原纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。结果与结论:经纯化鉴定获得纯度为95%的许旺细胞。移植后1,2,4周损伤段及邻近节段脊髓内可观察到Hoechst33342阳性细胞。术后4周,许旺细胞移植组与空白对照组、DMEM对照组BBB评分差异开始有显著性意义(P0.05),且许旺细胞移植组高于空白对照组、DMEM对照组。苏木精-伊红染色示各组均有脊髓空洞形成,许旺细胞移植组空洞小于空白对照组、DMEM对照组。免疫组织化学染色示空白对照组、DMEM对照组胶质原纤维酸性蛋白反应较强,许旺细胞移植组胶质原纤维酸性蛋白阳性面积小于其他组(P0.05);许旺细胞移植组神经元特异性烯醇化酶的阳性面积明显大于其他组(P0.05)。提示静脉移植许旺细胞修复大鼠脊髓损伤是可行的,操作简便,且有较好的疗效。
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