| 摘 要： | 背景:海藻酸有相对温和的凝胶条件与良好的生物相容性,已广泛应用于生物组织工程。目的:采用海藻酸钠凝胶复合异种骨的方法,构建骨组织工程载体,观察载体中细胞的生物性能及体内成骨能力。方法:取2只2周龄新西兰兔的骨髓,以1×10-8mol/L重组人骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞。取诱导后第2代骨髓间充质干细胞接种于1%海藻酸钠凝胶中,培养4d苏木精-伊红染色观察凝胶中细胞形态。将第2代骨髓间充质干细胞分为单纯DMEM凝胶组和含1%海藻酸钠的DMEM凝胶组,分别培养7d后行骨形态发生蛋白2免疫组织化学染色观察。取24只裸鼠,随机分为2组,于两侧股部肌袋中分别植入骨髓间充质干细胞/海藻酸钠凝胶/牛松质骨复合体作为实验组,骨髓间充质干细胞/牛松质骨复合体作为对照组。术后2,4周后组织学观察复合体成骨情况,图像分析系统分析各组成骨或软骨的面积百分比。结果与结论:海藻酸钠凝胶中骨髓间充质干细胞形态饱满,细胞悬浮于凝胶中,可见细胞分裂和核分裂相。单纯DMEM凝胶组和含1%海藻酸钠的DMEM凝胶组免疫组织化学观察,细胞分裂增殖正常,伸出多种形态的突起,胞核大,核仁清晰。单纯DMEM凝胶组和含1%海藻酸钠的DMEM凝胶组的骨形态发生蛋白2表达阳性率差异无显著性意义(P0.05)。扫描电镜观察海藻酸钠凝胶均匀地复合于牛松质骨微孔中,不同平面均有细胞生长。动物实验显示术后2,4周实验组和对照组的成骨或软骨的面积百分比差异有显著性意义(P0.05)。提示以海藻酸钠凝胶/牛松质骨构建骨组织工程载体,合乎组织工程载体的超结构原理,能最大限度地承载细胞,生物性能好,对骨髓间充质干细胞增殖和成骨表型及相关的生物性能无不良影响,在体内成骨效率较高。
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