| 慢病毒介导的RNAi敲低hTERT表达对人胶质瘤细胞系U87抑瘤作用的研究 |
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| 引用本文： | 赵鹏,傅震,尤永平,王存祖,陈云祥,陆小明,鲁艾林,刘宁. 慢病毒介导的RNAi敲低hTERT表达对人胶质瘤细胞系U87抑瘤作用的研究[J]. 中国现代神经疾病杂志, 2009, 9(6). DOI: 10.3969/j.issn.1672-6731.2009.06.011 |
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| 作者姓名： | 赵鹏 傅震 尤永平 王存祖 陈云祥 陆小明 鲁艾林 刘宁 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院神经外科,210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)敲低人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达水平对人胶质瘤细胞系U87的影响.方法 以慢病毒为载体的靶向hTERT小干扰RNA(siRNA)构建体Lt-I直接感染U87细胞,分别以无义序列Lt-non及体外常规培养的U87细胞作为载体对照和空白对照.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和端粒重复序列扩增(TRAP)法检测肿瘤细胞内源性hTERT表达水平和端粒酶活性,四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术检测细胞增殖活性和增殖周期,荧光原位杂交法检测端粒长度,Transwell法检测细胞体外侵袭力;同时观察注射慢病毒后裸小鼠皮下移植瘤生长情况.结果 体内外实验结果显示,Lt-I可明显降低肿瘤细胞内源性hTERT表达水平(均P=0.000)和端粒酶活性(均P=0.000);对细胞增殖活性和增殖周期无明显抑制作用(均P>0.05);感染后肿瘤细胞端粒长度无明显变化(均P>0.05);但对肿瘤细胞体外侵袭力(均P=0.000)和裸小鼠皮下移植瘤的生长具有较强抑制作用(均P<0.05).结论 RNAi技术通过抑制肿瘤细胞内源性hTERT表达水平、端粒酶活性和侵袭力而逆转人胶质瘤细胞系U87恶性表型,hTERT可望成为胶质瘤基因治疗的靶点.
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| 关 键 词： | 慢病毒属 转染 RNA,小分子干扰 端粒,末端转移酶 脑肿瘤 神经胶质瘤 基因表达调控 基因,肿瘤抑制 |
Study on the effect of lentivirus-mediated siRNA against hTERT in U87 cells |
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| ZHAO Peng,FU Zhen,YOU Yong-ping,WANG Cun-zu,CHEN Yun-xiang,LU Xiao-ming,LU Ai-lin,LIU Ning. Study on the effect of lentivirus-mediated siRNA against hTERT in U87 cells[J]. Chinese Journal of Contemporary Neurology and Neurosurgery, 2009, 9(6). DOI: 10.3969/j.issn.1672-6731.2009.06.011 |
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| Authors: | ZHAO Peng FU Zhen YOU Yong-ping WANG Cun-zu CHEN Yun-xiang LU Xiao-ming LU Ai-lin LIU Ning |
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