TNF-α、TGF-β1在胆汁淤积性肝硬化中平衡调控肝脏干细胞分化

目的探讨TNF-α、TGF-β1在胆汁淤积性肝硬化中的变化及其对肝脏干细胞分化平衡的影响。方法Balb/c小鼠行胆总管结扎术，血生化指标和肝脏HE染色评价造模情况；免疫组织化学和蛋白印迹检测造模后TNF-α、TGF-β1的变化；以小鼠胚胎肝脏干细胞HP14-19为研究对象，TNF-α、TGF-β1分不同浓度干预，蛋白印迹、Real-time PCR、PAS染色评价分化情况。结果胆总管结扎组中血生化指标明显升高（P<0.05），HE染色见胶原纤维增多，TNF-α、TGF-β1表达高于假手术组（P<0.05）；TNF-α、TGF-β1诱导分化3 d后，其分化情况与对照组相比，无明显差别；诱导分化5 d后，TNF-α、TGF-β1各浓度组的PAS染色强于对照组，TNF-α20、40、80 ng/mL浓度组的细胞角蛋白18（ck18）明显高于细胞角蛋白19（ck19）（P<0.05），而TGFβ1则相反，20、40、80 ng/mL浓度组的ck19 高于ck18（P<0.05）；诱导分化10 d 后，TNF-α、TGF-β1促分化的趋势与诱导5 d 时相同，且蛋白印迹、PAS染色更强，但Real-time PCR表达更低。结论胆总管结扎术能成功模拟胆汁淤积性肝硬化，TNF-α、TGF-β1在该疾病中表达均增加，但它们对于肝脏干细胞的分化平衡发挥着相互制约的作用：前者主要促进肝脏干细胞向肝细胞分化，而后者则主要促进其向胆管细胞分化。