| 三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用 |
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| 引用本文： | 翁艳洁,翁丹卉,夏曦,宋晓红,卢运萍,王世宣,马丁,王常玉. 三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用[J]. 中国癌症杂志, 2008, 18(4): 249-253 |
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| 作者姓名： | 翁艳洁 翁丹卉 夏曦 宋晓红 卢运萍 王世宣 马丁 王常玉 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 国家自然科学基金 , 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 背景与目的:shRNA技术是近来发展的热点技术之一,但普遍采用的单位点shRNA干扰载体效果并不理想.本研究探讨三位点短发卡状RNA在提高RNA干扰效率中的作用.方法:构建外源基因DsRed全长载体转染HEK293细胞.针对报告基因DsRed设计4个干扰载体,一个含有3段shRNA,另外3个分别含有此3段中1段shRNA.转染293/DsRed,荧光显微镜观察基因DsRed.应用实时定量PCR(Real-time PCR)和流式细胞仪(FACS)检测4个载体对DsRed基因在mRNA及蛋白水平干扰效应.结果:4个载体对靶基因DsRed在mRNA及蛋白水平均有干扰效应,且含有3段shRNA载体对DsRed基因干扰效率为(89±16)%,显著高于3个只含有1段shRNA载体[(50±23)%,(52±15)%,(55±27)%],差异有显著性(P<0.05).结论:三位点shRNA干扰载体可以提高对靶基因的干扰效率.
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| 关 键 词： | RNA干扰 外源基因 DsRed 短发卡状RNA 短发卡 干扰效率 作用 RNA interference enhancement hairpin short different 差异 靶基因 结果 干扰效应 蛋白水平 mRNA 检测 FACS 流式细胞仪 实时定量 应用 荧光显微镜 |
| 文章编号： | 1007-3639(2008)04-0249-05 |
| 修稿时间： | 2007-12-26 |
Effect of three different short hairpin RNAs in the enhancement of RNA interference |
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| WENG Yan-jie,WENG Dan-hui,XIA Xi,SONG Xiao-hong,LU Yun-ping,WANG Shi-xuan,MA Ding,WANG Chang-yu. Effect of three different short hairpin RNAs in the enhancement of RNA interference[J]. China Oncology, 2008, 18(4): 249-253 |
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| Authors: | WENG Yan-jie WENG Dan-hui XIA Xi SONG Xiao-hong LU Yun-ping WANG Shi-xuan MA Ding WANG Chang-yu |
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