TNF-α单抗Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达 |
| |
作者姓名: | 王卓智 王琰 李振甫 |
| |
作者单位: | 北京市肿瘤研究所,海军总医院,中国医学科学院肿瘤医院 |
| |
摘 要: | 目的进行TNF-α单抗Fab段基因的克隆并在大肠杆菌中表达。方法用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)从分泌抗人TNF-α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆重链Fd段和κ链基因;并用ELISA和免疫印迹分析证明表达的Fab段特异结合TNF-α。结果从分泌抗人TNF-α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆出了重链Fd段和κ基因。经DNA序列测定表明,VH、D、JH分别属于VH3D、DSP2和JH4;Vκ和Jκ分别属于Vκ1和Jκ1。将该Fd和κ链cDNA克隆到表达载体pComb3H中,在大肠杆菌中获得了表达。结论ELISA和免疫印迹分析表明,表达的Fab段可特异地和TNF-α结合。
|
关 键 词: | 肿瘤坏死因子 免疫球蛋白可变区基因 Fab段表达 |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |