| 人PDX-1基因真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 陈寒蓓,董艳,苏青.人PDX-1基因真核表达载体的构建及表达[J].上海交通大学学报(医学版),2007,27(1):85-87. |
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| 作者姓名： | 陈寒蓓 董艳 苏青 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院新华医院内分泌科 上海200092 |
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| 摘 要： | 目的构建人胰十二指肠同源盒(PDX-1)基因的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达。方法以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增PDX-1基因编码区的全部序列,克隆入真核细胞表达载体pcDNA3.1中,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因。序列正确的重组质粒用脂质体转染NIH3T3细胞,Western blot观察基因表达情况。结果PCR扩增的特异性片段长度为852 bp,以此构建的重组质粒pcDNA3.1-PDX-1,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后显示5.5 kb和850 bp左右的两条片段,测序结果与GenBank中的人PDX-1基因cDNA(GenBank序列号NM_000209)序列一致。证明PDX-1基因已成功克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1中。Western blot证实pcDNA3.1-PDX-1转染NIH3T3细胞24 h后有PDX-1的表达。结论成功构建了pcDNA3.1-PDX-1重组真核表达载体,并在NIH3T3细胞中表达。
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| 关 键 词： | 胰十二指肠同源盒 基因克隆 真核表达载体 转染 |
| 文章编号： | 0258-5898（2007）01-0085-03 |
| 修稿时间： | 2006-05-11 |
Construction and expression of human PDX-1 eukaryotic expression vector |
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| CHEN Han-bei,DONG Yan,SU Qing.Construction and expression of human PDX-1 eukaryotic expression vector[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2007,27(1):85-87. |
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| Authors: | CHEN Han-bei DONG Yan SU Qing |
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| Institution: | Department of Endocrinology, Xinhua Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200092, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pancreatic duodenal homeobox 1 gene clone eukaryotic expression vector transfection |
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